Hvordan plotte en Michaelis - Menten Curve

Mange biokjemiske reaksjoner er naturlig treg med mindre katalysert av enzymer som øker deres reaksjonshastighet . Enzymkinetikkenmåler enkelt substrat enzymatisk reaksjonshastighet ved å bruke Michaelis - Menten- ligningen v = [S] Vmax /[S] Km ​​. Den Michaelis - Menten likningen , oppkalt etter biokjemi Leonor Michaelis og lege Maud Menten ", beskriver forholdet mellom frekvensen av substrat omdanning av et enzym (V) , og konsentrasjonen av substrat ([s ] ) , " i henhold til Davidson College kjemi nettside . Basert på denne ligningen , kan det Michaelis - Menten kurve skal plottes med x - aksen representerer [ S ] i millimol og y - aksen representerer V i sekunder /micromole.Things du trenger
Michaelis - Menten ligningen
Kalkulator
Graph papir
Blyant
College biokjemi guide eller lærebok på
Vis flere instruksjoner
Forstå Michaelis - Menten Equation
en

Forstå hensikten for hver verdi i ligningen , og hva den representerer . V er hastigheten av omdanning eller reaksjonshastigheten , [S ] er konsentrasjonen av substratet , er Vmax den maksimale omdannelseshastigheten, og Km ( Michaelis -konstant) er substratkonsentrasjon ved hvilken omdannelseshastigheten er halvparten av Vmax .

to

Finn verdiene for hver variabel i ligningen . [S] er det kjent konsentrasjon for substratet som blir analysert , og endrer denne verdi vil påvirke graden av den enzym - katalyserte reaksjon. Km og Vmax verdier er vanligvis oppført med underlaget så godt i form av millimol og sek - en når gitt i et problem .
3

Løs riktig ligning for hver verdi hvis verdiene er ikke gitt . Ifølge Mills College Biokjemi hjemmeside , begynne med steady state liknings k1 [ Efree ] [ S ] = ( k - 1 + k2 ) [ ES ] . Definer Km ved hjelp av ligningen Km - 1 = k1 /( k - 1 + k2 ) . Løs for [ES] ved hjelp av ligningen [ES ] = [S] [ Et ] /(Km + [ S] ) for å få [ Ef ] og [ S] . Bruk [ Ef ] for å definere Vmax ved hjelp av ligningen vmax = kcat [ Et ] . Ta kontakt med en høgskolenivå biokjemi guide eller lærebok for detaljerte instruksjoner om hvordan å løse hver av disse ligningene og for spesifikke definisjoner av hver variabel .
4

Sett Km , [ S ] og Vmax inn i Michaelis - Menten ligning og løse for V , hastigheten eller reaksjonshastigheten .
plotte Michaelis - Menten Curve
5

Bruke millimeterpapir , tegne en x - og y - aksen . Etiketten x-aksen mM [ S] eller konsentrasjon av substrat. Etiketten y ax- sec /mikro- mol av V eller hastigheten av reaksjon.
6

Sett forskjellige verdier av [S ] inn i Michaelis - Menten- ligningen , sammen med verdiene som ble funnet for Km og Vmax , for å løse for V.
7

Plott verdiene for [ S ] på x - aksen og de ​​tilsvarende løst verdier for V på y - aksen . Grafen skal se ut som en rektangulær hyperbel der høyere konsentrasjoner av underlaget likestille til raskere enzymatiske reaksjoner .